Differences

This shows you the differences between two versions of the page.

Link to this comparison view

project:biolab:brmhistology [2017/09/21 01:01] (current)
sumie-dh created
Line 1: Line 1:
 +====== BrmHistology ======
 +
 +{{template>​project:​infobox|
 +name=BrmHistology|
 +image=nahled.jpg?​400|
 +founder=[[user:​sumie-dh]]|
 +interested=[[user:​sachy]]|
 +status=active
 +}}
 +
 +~~META:
 +status = active
 +&​relation firstimage = :​project:​projectlogo.png
 +~~
 +
 +Uz pres rok rezeme zivocichy [mrtve, zivi se prilis hemzi] na platky a menime prirozene bezbarve tkane na 50 odstinu fialove/​ruzove ;]
 +
 +==== Technika ====
 +
 +===Mikrotomy===
 +
 +== Mikrotom sankovy==
 +
 +{{http://​www.sumie-dh.cz/​images/​gallery/​mikrotom2.jpg?​direct&​400}}
 +
 +Pro presnejsi histologickou praci stoji na mikroskopovacim stole mikrotom Meopta 596 C8. Je to poradny kus kovu, prosime nepresouvat ;] Nuz je k dispozici na vyzadani pote co bude zajemce obeznamen s funkci pristroje, bez toho je velice snadne se nozem zranit nebo ho znicit [popripade oboji]. ​
 +Mikrotom je vhodny pro rezani tkani zalitych do parafinu, tloustka rezu je nastavitelna do 3 um.
 +
 +PS: tento pristroj neni hackable, je to jedna z tech veci kterou nelze prilis obejit DIY projektem, je potreba poctivy kus tezkeho zeleza ;]
 +
 +PPS: pokud uz mate opravdovy mikrotom, lze s nim provadet drobnejsi hacky, napr. pokud je potreba prichladit vzorek [parafin se krouti, lame v teple mistnosti], hodi se Peltieruv clanek
 +
 +{{http://​www.sumie-dh.cz/​images/​gallery/​peltiersedi.jpg?​direct&​400}}
 +
 +
 +== Mikrotom [rucni] ==
 +
 +owner: [[:​user:​pinky|pinky]]
 +
 +[[https://​brmlab.cz/​lib/​exe/​fetch.php?​tok=36b318&​media=http://​www.sumie-dh.cz/​images/​gallery/​mikrotom.jpg|{{http://​www.sumie-dh.cz/​images/​gallery/​mikrotom.jpg?​direct&​400}}]] [[https://​brmlab.cz/​lib/​exe/​fetch.php?​tok=d96fa6&​media=http://​www.sumie-dh.cz/​images/​gallery/​mikrotom-nuz.jpg|{{http://​www.sumie-dh.cz/​images/​gallery/​mikrotom-nuz.jpg?​direct&​400}}]]
 +
 +Pocitejte s tim ze u tohoto mikrotomu nedosahnete kvality kterou vetsina skutecne histologicke prace vyzaduje, vzdy dostanete vzorek na nemz bude videt nekolik vrstev bunek, pri barveni budete videt "​orvane"​ okraje tkani, ktere se barvi ochotneji nez u spravne rozvnomerne provedeneho rezu. 
 +Je ale dostacujici na nektera pozorovani rostlinnych pletiv a tkani, ktere maji transparentnejsi charakter [napr. tuk nebo chrupavky]. K mikrotomu patri mikrotomovaci nuz [je mozno nahradit ziletkami, pokud zjistite ze je nuz tupy a nemate odvahu jej brousit]. ​
 +
 +Princip prace s mikrotomem je videt nize na videu [popripade si chytte [[:​user:​sumie-dh|sumie-dh]],​ ukaze vam to pokud si nejste jisti].
 +
 +{{youtube>​uB-acKfWlV4?​medium}}
 +
 +\\
 +\\
 +
 +=== Mikroskopy ===
 +
 +...maji vlastni [[equipment:​brmicroscopy|wiki]] ;]
 +
 +=== Histologicke barvicky ===
 +
 +Aktualne disponujeme slusnou paletou barviv vhodnych pro mikroskopii. Podivejte se co se schovava v [[http://​brmko.brm/​chemlab.html|http://​brmko.brm/​chemlab.html]] pod tagem barvivo. Pokud najdete pozadovanou barvicku jako roztok, je doporucovany postup jej pouzit misto vyroby noveho roztoku. Barvicky jsou drahe a spousta protokolu ktere najdete "nekde na internetu"​ nefunguji tak jak by mely. Konzultujte nejen techniku, ale i pouzitou chemii s chemlabaky , napr s [[:​user:​pinky|pinky]],​ je mozne ze lze pouzit chemii setrnejsi k pozorovateli a cene procedury. ​
 +
 +=== Drobne potreby vhodne k priprave vzorku ===
 +
 +Muze se hodit:
 +
 +Preparacni sada [pinzety, preparacni jehly, ocni nuzky]\\
 +500ml topne hnizdo + sklenena misticka na vodu vhodna na natahovani rezu\\
 +Velka hodinova skla pro zachytavani nepovedenych rezu\\
 +Stetce pro cisteni mikrotomu\\
 +Sklenene desky vhodne jako podlozka pri montovani rezu\\
 +
 +=== Drobne 3D modely ===
 +
 +Nektere veci mame jiz namodelovane pro 3D tisk, vyhneme se tak efektu 'lze koupit pouze v baleni po 500ks'​. Zalevaci komurky je vhodne tisknout z tepelne odolnejsiho plastu, napr PET. Vetsina plastu
 +pouzivanych v 3D tisku se nekamaradi s prosvetlovacimi rozpoustedly [benzen, toluen, xylen].
 +
 +Zalevaci komurky [base molds]
 +
 +[[http://​www.sumie-dh.cz/​data/​files/​dock.stl|mrnave vzorky]]\\
 +[[http://​www.sumie-dh.cz/​data/​files/​38-29-10.stl|male vzorky]]\\
 +[[http://​www.sumie-dh.cz/​data/​files/​jicen.stl|stredni vzorky]]\\
 +[[http://​www.sumie-dh.cz/​data/​files/​jicen-vetsi.stl|velke vzorky]]\\
 +
 +Histologicke kazety [male]
 +
 +[[http://​www.sumie-dh.cz/​data/​files/​cassete-v2.stl|vrsek]]\\
 +[[http://​www.sumie-dh.cz/​data/​files/​cassete-spodek3.stl|spodek]]\\
 +
 +Kosticky do mikrotomove svorky > dobre nam funguji [[https://​www.thingiverse.com/​thing:​955078|LEGO kostky]] ;]\\
 +Nastavitelne boxiky na [[https://​www.thingiverse.com/​thing:​1416590|zamontovane vzorky]]
 +
 +==== Barvici protokoly ====
 +
 +Z hovoru s odborniky s praxi z oboru vyplynulo ze internet neni prilis dobrym zdrojem ​ spolehlivych protokolu.
 +Proto postupy prebirame ze skripta Histologie a histologická technika II od Zdenka Vacka. Oba dily velmi pravdepodobne najdete v biolabi knihovne.
 +
 +V biolabu se pouziva odvodnovani alkoholovou radou, prosvetlovani toluenem a zalevani do parafinu [Paraplast s ruznou teplotou tani]. Mame DYI verzi vodni lazne pro parafinovani a termostat pro 
 +natahovani parafinovych rezu na sklicko.
 +Montuje se do Eukittu kvuli jednoduchosti [odpada nutnost vracet rezy zpet do termostatu kvuli tvrdnuti kanadskeho balzamu].
 + 
 +
 +Vyzkouseli jsme a fungovalo:
 +
 +Eosin-Hematoxylin\\
 +Nisslovo barveni\\
 +Grammovo barveni\\
 +Bielschowskeho protokol [nervove fibrily]
 +Fuchsin [barveni rostlinnych pletiv]
 +
 +
 +==== Vysledky ====
 +
 +Mame v supliku nekolik vzorku v koukatelne kvalite [casem dostanou vlastni wiki] :
 +
 +__Savci__ ​
 +
 +[[http://​www.sumie-dh.cz/​images/​gallery/​deloha-s.jpg|Deloha [Prase domaci]]] \\
 +[[http://​www.sumie-dh.cz/​images/​gallery/​esophagus-pano1.jpg|Jicen ​ - [Prase domaci - prurez]]] \\
 +[[http://​www.sumie-dh.cz/​images/​gallery/​uzlina.jpg|Mizni uzlina - [Tur domaci]]] \\
 +
 +__Ptaci__
 +
 +Jicen [Kachna domaci] \\
 +
 +__Ryby__
 +
 +[[http://​www.sumie-dh.cz/​images/​gallery/​pyloric-region.jpg|Zaludek [Tetra paraquayska - Moenkhausia sanctaefilomenae]]]\\
 +Strevo ​ [Tetra paraguayska - Moenkhausia sanctaefilomenae]\\
 +[[http://​www.sumie-dh.cz/​images/​gallery/​vajca21.jpg|Vajecnik [Tetra paraguayska - Moenkhausia sanctaefilomenae]]]\\
 +Rez koronarni [Zivorodka endlerova - Poecilia wingei ♀]\\
 + 
  
 
Except where otherwise noted, content on this wiki is licensed under the following license: CC Attribution-Noncommercial-Share Alike 4.0 International
Recent changes RSS feed Donate Powered by PHP Valid XHTML 1.0 Valid CSS Driven by DokuWiki